PMSF的配置方法及注意事项


PMSF是丝氨酸蛋白酶和乙酰胆碱酯酶抑制剂。它抑制蛋白酶,如糜蛋白酶、胰蛋白酶、木瓜蛋白酶、巯基蛋白酶如凝血酶。PMSF抑制丝氨酸蛋白酶的磺化的丝氨酸残基的活性部位。
 
注意事项(//gzmingshengwine888.cn):
1.PMSF(苯甲基磺酰氟)溶解到异丙醇中,不能溶解到水中的。-20℃保存也会有结晶析出,这是正常的,等到温度稍高混匀就可以了。
2.PMSF严重损害呼吸道粘膜、眼睛及皮肤,吸入、吞进或通过皮肤吸收后有致命危险。一定要注意防护,手套和口罩。
3.一旦眼睛或皮肤接触了PMSF,应立即用大量水冲洗之。凡被PMSF污染的衣物应予丢弃。
4.PMSF在水溶液中不稳定。应在使用前从贮存液中现用现加于裂解缓冲液中。
5.PMSF在水溶液中的活性丧失速率随pH值的升高而加快,且25℃的失活速率高于4℃。pH值为8.0时,20μmmol/l PMSF水溶液的半寿期大约为85min,这表明将PMSF溶液调节为碱性(pH>8.6)并在室温放置数小时后,可安全地予以丢弃。
 
PMSF的配制方法//gzmingshengwine888.cn
溶解174mg的PMSF(苯甲基磺酰氟)于足量的异丙醇中,定容到10ml,分装成小份贮存于-20℃,使用时终浓度一般为1mmol/L。
 
使用介绍//gzmingshengwine888.cn
1)抑制丝氨酸蛋白酶(如胰蛋白酶,胰凝乳蛋白酶,凝血酶)和巯基蛋白酶(如木瓜蛋白酶); 
2)10mg/ml溶于异丙醇(或无水乙醇)中; 
3)在室温可保存一年,一般保存在-20度或4度.; 
4)工作浓度:17~174ug/ml(0.1~1mM),储存液浓度为100或200mM; 
5) 在水液体溶液中不稳定,30分钟就会降解一半,必须在每一分离和纯化步骤中加入新鲜的PMSF,样品处理超过1h,补加一次。(见水分解,使用前加入)。
 
 
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